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      银耳卫生标准

      发布日期: 2005-04-21   来源:中国食用菌商务网

       1主题内容与适用范围
         
      本标准规定了市售银耳的卫生要求。
         
      本标准适用于人工合成料栽培银耳、人工段木栽培银耳和野生银耳。银耳制品和鲜银耳亦可参照此标准。
          2
      引用标准
          GB5009.11
      食品中总砷的测定方法
          GB5009.12
      食品中铅的测定方法
          GB5009.17
      食品中总汞的测定方法
          3
      感官指标
         
      感官指标见表1。
         
      项目指标
         
      外形色泽气味
         
      干成品朵形完整。合成料栽培叶片白色或浅黄色,应具有银耳正常
         
      银耳直径≥3cm;段木表面有光泽,耳基芳香气味,无异
         
      栽培银耳直径≥lcm部呈米黄色或橙色,味、异嗅
         
      无霉点,霉斑
         
      干成品浸泡(40℃,30min)朵形
         
      完整,直径明显增大,
         
      叶片应完全展开或基本
         
      展开,边缘整齐,有弹
         
      性,无发粘,软塌现象  
          4
      理化指标
         
      理化指标见表2
         
      项目指标,mg/kg
         
      米酵菌酸0.25
         
      (Pb)2.0
         
      (As)1.5
         
      (Hg)0.6
          5
      检验方法
          5.1
      米酵酸菌[bongkrekicacid(BA),即酵米面黄杆菌毒索A(flavotoxinA)〕是由椰毒假单胞菌(pseudomanascocovenenans)产生的一种可以引起食物中毒的毒素。系统命名为:3-羧甲基-17-甲氧基-6,18,21-三甲基-甘二碳-2,4,8,12,14,18,20-七烯二酸、结构式为:
          5.1.1
      薄层色谱测定法
          5.1.1.1
      原理
         
      样品中的米酵菌酸经提取、净化及浓缩后,根据其在短波紫外光GF254硅胶薄层色谱上显示黑色点的最低检出量测定含量。
          5.1.1.2
      仪器
          a.
      层析槽(内径长××高,cm25×6×4)
          b.GF254
      娃胶薄层(50mm×200mm×0.3mm),自制,经110115℃活化2?3h,置干燥器中可保存一周;
          c.
      紫外线灯(波长254nm);
          d.
      紫外分光光度计。
          5.1.1.3
      试剂
         
      本标准所用的试剂除特殊规定外,均为分析纯,水为蒸馏水或同等纯度的水,溶液为水溶液。
          a.
      硅胶GF254层析用;
          b.
      薄层色谱展开剂:石佃醚-无水乙醚-冰乙酸[6040l.5(vv)〕;
          c.
      米酵菌酸标准溶液:称取米酵菌酸标准品,用甲醇配制成每毫升含有米酵茵酸20μg作测定用,置于4℃冰箱中避光保存;
          d.
      甲醛;
          e.
      冰乙酸;
          f.
      石油醚,沸程30?60℃;
          g.
      无水乙醚;
          h.
      三氯甲烷;
          i.85g
      100mL磷酸;
          j.4
      (VV)碳酸氢钠水溶液;
          k.6mol
      L盐酸。
          5.1.1.4
      操作方法
          5.1.1.4.1
      米酵菌酸的提取
         
      干银耳样品经粉碎过40目筛后,称取20g,置具塞锥形瓶中,加入甲醇20mL,于室温中避光浸泡lh,然后再加入三氯甲烷80mL85g100mL磷酸0.2mL,鲜银耳样品经剪碎、磨细及混匀后称取10g,加入甲醇16mL于室温中避光浸泡lh,然后再加入三氯甲烷64mL85g100mL的磷酸0.16mL;振荡30min,过滤,干银耳取滤液50mL,鲜银耳取滤液40mL。
         
      将以上滤液移入分液漏斗中,加入与滤液体积相同的4(VV)碳酸氢钠水溶液,振摇2min,静置分层,用带自动控制球吸管吸出上层于另一分液漏斗中,再用4(VV)碳酸氢钠水溶液重复提取两次,每次10mL,轻摇,静置,将三次碳酸氢钠水层合并,加入三氯甲烷25mL,振摇2min,静置分层后弃去三氯甲烷层,于分液漏斗中慢慢滴入6molL盐酸以调该溶液PH2?3,加入石油醚(沸程30?60℃)50mL(鲜银耳样品加40mL),振摇3min,静置分层,取出石油醚层于梨形瓶中,再重复用石油醚30mL20mL各提取一次(鲜银耳样品两次均为20mL),将石油醚层并人同一瓶中,于40℃水浴中减压吹气浓缩至干,用甲醛移至带lmL刻度的浓缩管中,于40℃用减压法浓缩至0.2mL以下,并用少许甲醇洗管壁,继续浓缩至干,加甲醛0.125mL,将干物质溶解,混匀,作为样液以供薄层色谱测定用。
          5.1.1.4.2
      薄层色谱测定
         
      以薄层板的短边为底边,距底边3cm的基线上用微量注射器滴加20ugmL标准液8μL10μL两个点,以及样液两个点,每点10μL(鲜银耳样品滴加20μL),在样液的一个点上再滴加20μgmL标准液10μL。用展开剂展开16cm,取出挥干。在254nm紫外灯光下观察结果如下:(1)标准点应出现黑色点;(2)如样液点在标准点相应位置上未出现黑色点,则样品中米酵菌酸的含量在测定方法灵敏度0.25ppm以下;如在相应位置上有黑色点,而另一点中样液与标准液点重叠,则为阳性,根据样液黑点的强度估计减少滴加微升数,或经稀释后再滴人不同微升数,直至样液与标准色点的强度与面积一致为止。米酵菌酸的比移值为0.22。
          5.1.1.4.3
      计算
          V11
          X1=0.2?------?D?----…………………(1)
          V2m1
         
      式中:X1?米酵菌酸含量,μgg;
          0.2??
      米酵菌酸的最低检出量,μg;
          V1?
      加入甲醇溶解的体积,mL;
          V2?
      出现最低检出量时滴加样液的体积,mL;
          D??
      样液的总稀释倍数;
          m1?
      甲醇溶解时相当样品的质量,g。
          5.1.1.4.4
      确证试验
         
      对含量高的样品可以进一步作确证试验;将剩余的阳性样液与空白甲醇液分别经薄层分离后,刮下并收集与米酵菌酸标准相应的色谱带与空白处硅胶。各加甲醇4mL,于室温中浸泡l2h,混匀,离心,吸出上清液,以空白硅胶甲醇洗脱液作对照,用紫外分光光度计测定,应在267nm236nm处有米酵菌酸的两个最高吸收峰。
          5.1.2
      高压液相色谱测定法
          5.1.2.1
      原理
         
      样品中的米酵菌酸经提取、净化及浓缩后,根据在高压液相色谱上的出峰面积测定含量。
          5.1.2.2
      试剂
          a.
      高压液相色谱洗脱剂:甲醇--冰乙酸[75271.7(VV),在配制前,所用试剂及水均需分别重蒸馏。
          b.
      其他试剂同5.1.1.3c、d、e、I、g、h、i、j、k。
          5.1.2.3
      仪器
          a.
      高压液相色谱仪;
          b.20μL
      样品环;
          c.
      分光光度检定器,调波长至267nm;
          d.
      求积仪;
          e
      、防护柱4.6mmID×5cm,内装C?18硅胶,粒度直径为10μm;
          f.
      分析柱AltexUltrasphereTM?ODS,粒度直径为u5m,4.6mmID×25cm。
          5.1.2.4
      操作方法
          5.1.2.4.1
      米酵菌酸的提取
         
      5.1.1.4.1,但最后不用甲醇转移,直接于瓶内加入甲醇0.5mL,将干物质溶解,混勾,取出上清液经离心后,置小试管中,作为样液供高压液相色谱测定用。
          5.1.2.4.2
      高压液相色谱测定
         
      高压液相色谱操作条件:流速1.1mLmin,纸速0.5cmmin,检定器灵敏度为将10μgmL标准液20uL调至满刻度的70%一90%。在作高压液相色谱时,首先用洗脱液平衡分析柱,从进样口装置分别进入不同浓度的标准液与样液各20uL。在米酵菌酸标准峰面积的直线范围内。将样液与标准的峰面积相比以求出样品中米酵菌酸的含量。米酵菌酸的保留时间为17min。
          5.1.2.4.3
      计算
          A1
          X2=C?----?V?D------……………………(2)
          Sm2
         
      式中:X2?米酵菌酸含量,μgg
          C??
      米酵菌酸标准溶液的浓度,μgmL;
          A??
      样液的峰面积;
          s??
      米酵菌酸标准溶液的峰面积;
          v??
      加入甲醇溶解的体积,mL;
          D??
      样液的总稀释倍数;
          m2?
      甲醇溶解时相当样品的质量,g。
          5.1.2.4.4
      确证
         
      如阳性样品还需用薄层色谱法中样液与标准液点重叠的方法确证。
          5.2
      铅的测定
         
      按照GB5009.12执行。
          5.3
      砷的测定
         
      按照GB5009.11执行。
          5.4
      汞的测定
         
      按照GB5009.17执行


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